在微生物培養(yǎng)時(shí)經(jīng)常會(huì)用到顆粒培養(yǎng)基，但是，在配制培養(yǎng)基過程中偶爾會(huì)出現(xiàn)不凝固、半凝固或者一搖晃培養(yǎng)基就破碎的現(xiàn)象，這是什么原因?
 

　　大量文獻(xiàn)指出，瓊脂的凝固程度主要受到PH值和瓊脂含量的影響，PH值較低(≤4.0)時(shí)，PH值是影響凝固等級(jí)的主要因素;PH值較高(5.0~8.0)時(shí)，瓊脂濃度是影響凝固等級(jí)的主要因素。
 

　　藥典上培養(yǎng)基配方中明確規(guī)定了PH值和瓊脂含量，如配制操作正常，凝固應(yīng)是不會(huì)出現(xiàn)問題的。為此，我們針對培養(yǎng)基出現(xiàn)的凝固異常進(jìn)行了分析及試驗(yàn)：
 

　　一、培養(yǎng)基PH值問題：培養(yǎng)基滅菌前后PH值有何變化?經(jīng)查閱大量相關(guān)學(xué)術(shù)研究，不同培養(yǎng)基滅菌前后PH普遍有這樣的變化超勢：高壓滅菌前pH值4.5-8.0的培養(yǎng)基滅菌后pH值變化較小，偏酸性的略上升，偏堿性的略下降。但酸性或堿性較強(qiáng)的培養(yǎng)基滅菌前后PH值變化較大。因我們常使用的培養(yǎng)基pH值均在4.5-8.0范圍內(nèi)，所以偶爾出現(xiàn)的培養(yǎng)基凝固不好應(yīng)不是PH值影響的。
 

　　二、瓊脂問題：瓊脂是培養(yǎng)基zui常用的凝固劑，是一種海藻多糖，PH在4-10之間才會(huì)形成凝膠，且其凝膠強(qiáng)度和瓊脂糖的濃度有關(guān)。目前我們實(shí)驗(yàn)室使用的均是成熟配方的培養(yǎng)基，為什么會(huì)偶爾出現(xiàn)凝固不好的現(xiàn)象呢?
 

　　在仔細(xì)核查了瓊脂粉的生產(chǎn)廠家、批號(hào)、保質(zhì)期及配制時(shí)的稱量、溶解、定容和轉(zhuǎn)移等過程。排除了瓊脂粉質(zhì)量問題，但發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基分裝準(zhǔn)備高溫滅菌時(shí)，有部分經(jīng)開水溶解的瓊脂呈細(xì)小顆粒狀沉在瓶底，即未*溶解，后查閱資料發(fā)現(xiàn)，瓊脂加熱至95℃時(shí)才開始溶解，說明我們用熱水溶解瓊脂時(shí)，瓊脂未能*溶解，這可能是導(dǎo)致培養(yǎng)基難凝固的原因。
 

　　于是我們在配制顆粒培養(yǎng)基時(shí)，先將瓊脂煮沸5分鐘后再分裝、滅菌，后培養(yǎng)基冷卻至40℃時(shí)能*凝固。自瓊脂溶解方式改變后，便未再出現(xiàn)培養(yǎng)基不凝固、半凝固或者一搖晃培養(yǎng)基就破碎的現(xiàn)象。